1. 單波長(zhǎng)單光束分光光度計(jì)是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用、維護(hù)比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度計(jì)。其設(shè)計(jì)原理和結(jié)構(gòu)具有以下特點(diǎn)：①單光束光路，從光源到試樣至接收器只有一個(gè)光通道，使用中依次對(duì)參考樣品和待測(cè)試樣進(jìn)行測(cè)定，然后將二次測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行比較、計(jì)算，獲得終結(jié)果；②儀器只有一個(gè)色散元件，工作波長(zhǎng)范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡(jiǎn)單電子系統(tǒng)，用電表或數(shù)字顯示；④結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、附件少、功能范圍小，不能做特殊試樣如渾濁樣品、不透明樣品等的測(cè)定。

 

2.單光束分光光度計(jì)檢測(cè)的準(zhǔn)確性不夠穩(wěn)定，不能用于精密分析。雙光束分光光度計(jì)的光路設(shè)計(jì)在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個(gè)光束分裂器或斬波器，作用是以一定的頻率將一個(gè)光束交替分成兩路，使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液，然后由一個(gè)檢測(cè)器交替接收或由兩個(gè)匹配器分別接收兩路信號(hào)。這是目前國內(nèi)外使用多，性能較為完善的一類分光光度計(jì)。原理和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：①從光源到檢測(cè)器有試樣光路和參考光路兩條通路，可同時(shí)對(duì)檢測(cè)樣品和參考樣品進(jìn)行測(cè)定，直接獲得檢測(cè)數(shù)據(jù)，還可自動(dòng)補(bǔ)償檢測(cè)時(shí)因條件的隨機(jī)變化（如溫度變化、電源電壓波動(dòng)、放大器增益變化、儀器掃描、記錄系統(tǒng)的間隙變化等）或樣品中非測(cè)定組分的干擾所引起的影響，比單光束分光光度計(jì)使用更方便、準(zhǔn)確；②一般采用兩個(gè)光柵或棱鏡加光柵的雙單色器，能有效地提高分辨率和降低雜散光；③可以自動(dòng)進(jìn)行波長(zhǎng)掃描、自動(dòng)記錄光譜曲線，也可以外接計(jì)算機(jī)，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化運(yùn)行；④可裝備各種附件，光、電、機(jī)緊密結(jié)合，功能范圍寬。

 

3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)能較好的解決由于非特征吸收信號(hào)（如試樣的渾濁、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面的折射差別等）影響而帶來的誤差。其基本原理是從同一光源發(fā)出的光分為兩束，分別經(jīng)兩個(gè)單色器分光后得到兩束不同波長(zhǎng)（λ1，λ2）的單色光，經(jīng)斬光器使兩束光以一定頻率交替照射同一樣品，然后經(jīng)過檢測(cè)器顯示出兩個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度差值（ΔA=Aλ1-Aλ2）。

 

只要λ1、λ2選擇適當(dāng)（被測(cè)物在一個(gè)波長(zhǎng)上有大吸收峰，在另一個(gè)波長(zhǎng)上沒有吸收或很少吸收；而非被測(cè)物在兩個(gè)波長(zhǎng)上的吸收是相同的），ΔA就是消除了非特征性吸收干擾（即扣除了背景吸收）的吸光度值。這樣即可自動(dòng)扣除背景的影響。雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)不用參比溶液，只用一個(gè)待測(cè)溶液，大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確度。